Ένα Σύστημα Αυτόνομης Διάγνωσης και Εξόντωσης Νεοπλασματικών Κυττάρων

CASE STUDY / MINI REVIEW

The “Genome Sentinel” Multi Gate Platform:

Ένα Σύστημα Αυτόνομης Διάγνωσης και Εξόντωσης Νεοπλασματικών Κυττάρων

Lead Bio Engineer: Dr. Δημήτριος Γ. Κίμογλου

https://osf.io/74su5/files/d7pgb

© 2025 Δρ. Δημήτριος Γ. Κίμογλου. Με επιφύλαξη παντός νόμιμου δικαιώματος.

Project Classification: Next Gen Synthetic Oncology v2.0

Year: 2025

Abstract

Η κλασική ογκολογία συχνά αποτυγχάνει να εξαλείψει πλήρως τους συμπαγείς όγκους λόγω της έντονης ενδο όγκου ετερογένειας και της ικανότητας των καρκινικών κυττάρων να διαφεύγουν της ανοσοεπιτήρησης και της χημειοθεραπείας. Η παρούσα εργασία παρουσιάζει την πλατφόρμα “Genome Sentinel”, ένα συνθετικό γενετικό κύκλωμα πολλαπλών πυλών (multi gate) που λειτουργεί ως βιολογικός επεξεργαστής για αυτόνομη ανίχνευση και στοχευμένη εξόντωση νεοπλασματικών κυττάρων. Το κύκλωμα συνδυάζει tumor specific promoters (hTERT, survivin, VEGF), miRNA βασισμένη λογική (miR 122, miR 21), ένα κλασικό suicide gene σύστημα (HSV TK/ganciclovir) και έναν εξωτερικά ελεγχόμενο διακόπτη ασφαλείας βασισμένο σε doxycycline regulated Tet Off μηχανισμό. Η συμπεριφορά του συστήματος μοντελοποιείται μέσω Boolean λογικής και διαφορικών εξισώσεων (ODEs), ενώ προτείνεται ένα pipeline υλοποίησης από in silico σχεδιασμό μέχρι προκλινικές δοκιμές. Συζητούνται οι πιθανοί κλινικοί στόχοι, καθώς και τα κύρια ηθικά και ρυθμιστικά ζητήματα που συνοδεύουν τη μετάφραση τέτοιων «ζωντανών φαρμάκων» στην κλινική πράξη.

Keywords: synthetic biology, precision oncology, suicide gene therapy, hTERT promoter, survivin, VEGF, HSV TK/ganciclovir, Tet Off, miRNA logic, systems biology

1. Θεωρητικό υπόβαθρο: Η έννοια του Biological Logic Voting

Η παραδοσιακή ογκολογική θεραπεία αντιμετωπίζει τον όγκο ως σχετικά ομοιογενή οντότητα, ενώ στην πραγματικότητα οι περισσότεροι κακοήθεις όγκοι είναι μωσαϊκά από υποκλώνους με διαφορετικό γονιδιακό προφίλ, διαφορετική ανταπόκριση σε φάρμακα και διαφορετικό δυναμικό μετάστασης. Αυτή η ενδο όγκου ετερογένεια επιτρέπει την επιβίωση μικρών υποπληθυσμών που δεν στοχεύονται επαρκώς από την εκάστοτε θεραπεία, οδηγώντας σε υποτροπή και ανάπτυξη ανθεκτικών κλώνων.

Η πλατφόρμα “Genome Sentinel” εισάγει την έννοια του Biological Logic Voting, όπου η απόφαση για κυτταρικό θάνατο δεν βασίζεται σε έναν μόνο βιοδείκτη αλλά σε ένα σύνολο ανεξάρτητων, συμπληρωματικών σημάτων. Αντί να «πιστεύει» έναν μοναδικό προωθητή ή ένα μόνο γονίδιο, το κύκλωμα λειτουργεί σαν σύστημα ψηφοφορίας: πολυάριθμα καρκινικά signatures (aθανασία, αντίσταση στην απόπτωση, αγγειογένεση, απώλεια φυσιολογικών miRNA) πρέπει να είναι παρόντα ταυτόχρονα, ώστε να ενεργοποιηθεί η βαθμίδα εκτέλεσης. Με αυτόν τον τρόπο, το σύστημα προσεγγίζει την πολυπαραγοντική λογική του ανοσοποιητικού, μειώνοντας την πιθανότητα off target τοξικότητας και αυξάνοντας την ειδικότητα για κύτταρα με πραγματικά ογκογονικό φαινότυπο.

2. Αρχιτεκτονική του Bio Processor “Genome Sentinel”

Ο “Genome Sentinel” σχεδιάζεται ως τριεπίπεδο bio processor: (1) Βαθμίδα Ανίχνευσης (Sensory Layer), (2) Βαθμίδα Επεξεργασίας (Processing Layer) και (3) Βαθμίδα Εκτέλεσης (Actuator Layer). Κάθε βαθμίδα μετατρέπει αναλογικά βιοχημικά σήματα σε ψηφιακές λογικές καταστάσεις και υλοποιεί διαδοχικά φίλτρα ειδικότητας.

2.1 Βαθμίδα Ανίχνευσης (Sensory Layer)

Η Sensory Layer χρησιμοποιεί tumor selective promoters για να μεταφράσει τον καρκινικό φαινότυπο σε τρία βασικά σήματα εισόδου (S1, S2, S3):

Promoter hTERT (Sensor 1 – Αθανασία):

Ο προωθητής της καταλυτικής υπομονάδας της τελομεράσης (hTERT) είναι υψηλά ενεργός σε μεγάλο εύρος συμπαγών και αιματολογικών κακοηθειών, αλλά σχεδόν σιωπηλός στους περισσότερους φυσιολογικούς σωματικούς ιστούς. Η υπερέκφραση hTERT συνδέεται όχι μόνο με την κυτταρική αθανασία μέσω σταθεροποίησης των τελομερών, αλλά και με αύξηση της έκκρισης VEGF και προώθηση αγγειογένεσης.

Promoter Survivin (Sensor 2 – Αντίσταση στην απόπτωση):

Η survivin (BIRC5) είναι μέλος της οικογένειας των inhibitors of apoptosis (IAPs), με ελάχιστη ή μηδενική έκφραση στους ενήλικους φυσιολογικούς ιστούς, αλλά έντονη υπερέκφραση σε πολλούς τύπους όγκων. Ο προωθητής survivin επιτρέπει στο κύκλωμα να αναγνωρίζει κύτταρα που έχουν αποκτήσει δεσπόζουσα αντι αποπτωτική υπογραφή, κεντρικό hallmark του καρκίνου.

Promoter VEGF (Sensor 3 – Αγγειογένεση):

Ο VEGF (vascular endothelial growth factor) είναι βασικός οδηγός αγγειογένεσης σε υποξικά και ταχέως αναπτυσσόμενα νεοπλάσματα. Η χρήση του προωθητή VEGF προσδίδει ένα στοιχείο «μικροπεριβάλλοντος», στοχεύοντας κύτταρα που συμμετέχουν ενεργά στην αναδιαμόρφωση του αγγειακού δικτύου εντός του όγκου.

Οι τρεις προωθητές συνδέονται με modular εκφραστικές κασέτες που παράγουν ενδιάμεσους transcriptional activators ή ρυθμιστικά μικρά RNA, τα οποία στη συνέχεια εισέρχονται στη βαθμίδα επεξεργασίας. Με αυτόν τον τρόπο, η Sensory Layer αντιστοιχεί σε έναν αναλογικό προς ψηφιακό μετατροπέα (ADC) που κωδικοποιεί τη συνθήκη «καρκινικό vs μη καρκινικό» σε λογικά bits (S1, S2, S3).

2.2 Βαθμίδα Επεξεργασίας (Processing Layer – XOR/AND Logic και miRNA υπογραφές)

Στη βαθμίδα επεξεργασίας εφαρμόζεται RNA based λογική για τη διάκριση καρκινικών από φυσιολογικά κύτταρα, ενσωματώνοντας miRNA υπογραφές.

Στα υγιή ηπατικά κύτταρα, το miRNA 122 είναι άφθονο και αποτελεί χαρακτηριστικό marker ηπατοειδούς διαφοροποίησης. Ο σχεδιασμός του κυκλώματος εισάγει miR 122 binding sites στις 3′ UTR κρίσιμων mRNAs (π.χ. ενός master activator), προκαλώντας αποδόμηση ή αναστολή της μετάφρασης αυτών των transkrips, με αποτέλεσμα αυτο καταστολή του κυκλώματος στα φυσιολογικά ηπατοκύτταρα.

Αντίθετα, σε καρκινικά κύτταρα ή απο διαφοροποιημένους κλώνους, το miR 122 είναι συχνά μειωμένο ή απολεσθέν, ενώ το miR 21, ένα γνωστό oncomiR, είναι υπερεκφρασμένο και συνδέεται με προώθηση της επιβίωσης και της εισβολής. Το κύκλωμα ενσωματώνει λογική «absence of miR 122 AND presence of miR 21» μέσω συνδυασμού miR sponge στοιχείων και αισθητήρων, επιτρέποντας την ενίσχυση του σήματος μόνο σε κύτταρα με σαφώς ογκογονική miRNA υπογραφή.

Με χρήση AND, NOT και XOR συνδυασμών των σημάτων S1–S3 με τις miRNA εισόδους, η Processing Layer εφαρμόζει πολλαπλά φίλτρα: το κύτταρο πρέπει να εκφράζει τουλάχιστον δύο από τους τρεις ογκο προωθητές, να στερείται υγιούς miRNA υπογραφής (π.χ. miR 122) και να παρουσιάζει ογκο miRNA (π.χ. miR 21), για να περάσει στην έξοδο HIGH. Σε αυτό το σημείο ενεργοποιείται ένας positive feedback loop, όπου ένα ενδιάμεσο activator αυξάνει την έκφραση του ίδιου του και/ή του downstream suicide gene module, εξασφαλίζοντας απότομη μετάβαση από χαμηλή σε υψηλή ενεργοποίηση (bistable behavior).

2.3 Βαθμίδα Εκτέλεσης (Actuator Layer – HSV TK/Ganciclovir)

Για την τελική εξόντωση, η πλατφόρμα χρησιμοποιεί το κλασικό enzyme–prodrug suicide gene σύστημα HSV TK/ganciclovir.

Η HSV TK (thymidine kinase από ιό απλού έρπητα) φωσφορυλιώνει το προφάρμακο ganciclovir σε μονο , δι και τριφωσφορικά παράγωγα, τα οποία ενσωματώνονται στο DNA και προκαλούν τερματισμό της αντιγραφής, οδηγώντας σε απόπτωση των κυττάρων που εκφράζουν HSV TK. Επιπλέον, έχει περιγραφεί έντονο bystander effect, καθώς φωσφορυλιωμένα παράγωγα ganciclovir μπορούν να περάσουν σε γειτονικά κύτταρα μέσω gap junctions, επεκτείνοντας την κυτταροτοξικότητα και σε καρκινικά κύτταρα που δεν φέρουν το ίδιο το γονίδιο.

Το σύστημα προσφέρει διπλό έλεγχο:

Το κύκλωμα πρέπει να δώσει εντολή για έκφραση HSV TK (Genome Sentinel ON).

Ο κλινικός πρέπει να χορηγήσει ganciclovir συστηματικά.

Αν λείπει οποιοσδήποτε από τους δύο αυτούς παράγοντες, το κύτταρο δεν καταστρέφεται, παρέχοντας ένα επίπεδο ασφάλειας αντίστοιχο με two factor authentication σε ψηφιακά συστήματα.

3. Μαθηματική μοντελοποίηση (Systems Biology)

Η λειτουργία του “Genome Sentinel” μπορεί να περιγραφεί με συνδυασμό Boolean λογικής και συστημάτων συνήθων διαφορικών εξισώσεων, επιτρέποντας in silico προσομοίωση της απόκρισης σε διαφορετικά βιολογικά σενάρια.

Για το mRNA ενός τοξικού effector (π.χ. HSV TK ή ενός reporter), χρησιμοποιείται ενδεικτικά η εξίσωση:

d[mRNAtox]dt=ksyn⋅(S1∧S2∧S3)⋅¬(Shealthy)−ddeg⋅[mRNAtox]dtd[mRNAtox]=ksyn⋅(S1∧S2∧S3)⋅¬(Shealthy)−ddeg⋅[mRNAtox]

όπου S1,S2,S3S1,S2,S3 είναι Boolean συναρτήσεις που αναπαριστούν την ενεργοποίηση των hTERT, survivin και VEGF προωθητών, ενώ ShealthyShealthy αναπαριστά την παρουσία υγιούς υπογραφής (π.χ. υψηλό miR 122, απουσία miR 21). Οι παράμετροι ksynksyn και ddegddeg περιγράφουν αντίστοιχα τον ρυθμό σύνθεσης και αποικοδόμησης του mRNA.

Η εξίσωση μπορεί να εμπλουτιστεί με επιπλέον terms positive feedback, π.χ. αυτο ενίσχυση όταν το [mRNAtoxtox] ή η πρωτεΐνη HSV TK υπερβεί ένα threshold, οδηγώντας σε bistable dynamics όπου μικρές διαφορές στην είσοδο οδηγούν σε «όλα ή τίποτα» απόκριση. Μέσω εργαλείων όπως COPASI, MATLAB ή Python based μοντέλα, είναι δυνατόν να πραγματοποιηθούν προσομοιώσεις για: διαφορετικές εντάσεις προωθητών, διαφορετικά επίπεδα miRNA, διαβαθμισμένες δόσεις ganciclovir και doxycycline, και μεταβολές παραμέτρων που αντιστοιχούν σε βιολογικό θόρυβο ή κλωνική ποικιλότητα.

4. Ασφάλεια και Biocontainment: Ο εξωγενής Kill Switch (Tet Off/Doxycycline)

Δεδομένου ότι η πλατφόρμα έχει τη δυνατότητα αυτόνομης ενεργοποίησης εντός των κυττάρων, είναι κρίσιμο να υπάρχει ένας ισχυρός, εξωτερικά ελεγχόμενος μηχανισμός ασφαλούς απενεργοποίησης. Για αυτό τον λόγο, ενσωματώνεται ένα doxycycline ρυθμιζόμενο Tet Off σύστημα.

Στο κλασικό Tet Off σύστημα, ένας συνθετικός transcriptional activator (tTA: Tet responsive transactivator) συνδέεται σε ειδικά Tet responsive στοιχεία στον προωθητή (Ptettet) και ενεργοποιεί την έκφραση του downstream γονιδίου μόνο απουσία τετρακυκλίνης ή παραγώγων, όπως η δοξυκυκλίνη. Η παρουσία doxycycline αλλάζει τη διαμόρφωση του tTA, εμποδίζοντας τη δέσμευσή του στον Ptettet και οδηγώντας σε ταχεία και αντιστρεπτή καταστολή της έκφρασης.

Στον “Genome Sentinel”, ο Ptettet μπορεί να ελέγχει:

είτε την έκφραση ενός κρίσιμου positive feedback activator,

είτε απευθείας το HSV TK module.

Έτσι:

Χωρίς doxycycline, το κύκλωμα είναι δυνητικά ενεργοποιήσιμο εφόσον το επιτρέπουν τα βιολογικά σήματα.

Με χορήγηση doxycycline, ακόμα και αν όλες οι καρκινικές είσοδοι είναι παρούσες, η έκφραση HSV TK (ή του activator) αναστέλλεται και το κύκλωμα «παγώνει».

Αυτός ο εξωγενής kill switch προσθέτει μια τρίτη, ανεξάρτητη βαθμίδα ελέγχου πέραν της βιολογικής λογικής και του ganciclovir, επιτρέποντας στον κλινικό να διακόψει άμεσα τη δράση του κυκλώματος σε περίπτωση ανεπιθύμητων τοξικοτήτων ή απρόβλεπτης συμπεριφοράς.

5. Μεθοδολογία υλοποίησης (Implementation Workflow)

Η υλοποίηση της πλατφόρμας ακολουθεί ένα τυπικό pipeline συνθετικής βιολογίας και γονιδιακής θεραπείας:

In Silico Design

Σχεδιασμός των modular DNA δομών (promoter cassettes, UTRs με miRNA target sites, coding sequences για HSV TK, tTA, reporters) σε λογισμικό όπως Benchling, Geneious ή SnapGene.

Δημιουργία βιβλιοθήκης παραλλαγών των hTERT, survivin και VEGF promoters για fine tuning της έντασης έκφρασης, καθώς και διαφορετικών διατάξεων miRNA binding sites.

DNA Synthesis & Cloning

Παραγγελία συνθετικών DNA fragments και συναρμολόγηση με σύγχρονες cloning τεχνικές (Gibson Assembly, Golden Gate) σε κατάλληλα plasmid backbones για έκφραση σε θηλαστικά κύτταρα.

Επιλογή στοιχείων που επιτρέπουν μελλοντική μεταφορά σε ιικούς φορείς (π.χ. lentiviral vectors) για σταθερή ενσωμάτωση σε κλινικά πρωτόκολλα.

Transfection/Transduction

Αρχικές δοκιμές σε καρκινικές κυτταρικές σειρές (HeLa, HepG2, γλοιωματικές γραμμές κ.ά.), καθώς και σε φυσιολογικά ηπατοκύτταρα ή iPSC derived hepatocyte like cells ως controls.

Χρήση λιποσωματικών, πολυκατιονικών ή ιικών μεθόδων μεταφοράς, ανάλογα με την επιθυμητή διάρκεια έκφρασης και την κλινική σκοπιμότητα.

Functional Assays

Flow cytometry με reporters (GFP, mCherry) συνδεδεμένους με επιμέρους promoters και modules, για χαρτογράφηση της ενεργοποίησης υπό διαφορετικές συνθήκες (normoxia, hypoxia, παρουσία/απουσία miRNA mimics/inhibitors).

Χορήγηση ganciclovir σε κλιμακούμενες δόσεις και αξιολόγηση βιωσιμότητας (MTT, Annexin V/PI staining) για επιβεβαίωση της εκλεκτικής τοξικότητας του HSV TK/ganciclovir συστήματος.

Προσθήκη doxycycline σε διαφορετικά χρονικά σημεία και συγκεντρώσεις, για ποσοτικοποίηση της ταχύτητας και της πληρότητας της καταστολής του κυκλώματος (Tet Off dynamics).

Data Driven Optimization

Ενσωμάτωση των πειραματικών δεδομένων με τα μαθηματικά μοντέλα για ρύθμιση των παραμέτρων (ισχύς προωθητών, αριθμός miRNA sites, strength feedback loops).

Επιλογή των βέλτιστων construct variants για κάθε τύπο όγκου και προετοιμασία για in vivo μοντέλα (π.χ. xenografts σε ποντίκια).

6. Πιθανοί κλινικοί στόχοι και τύποι όγκων

Η πλατφόρμα “Genome Sentinel” είναι ιδιαίτερα ελκυστική για κακοήθειες με καλά χαρακτηρισμένο μοριακό προφίλ και έντονη έκφραση hTERT, survivin, VEGF και ογκο miRNAs. Παραδείγματα αποτελούν το ηπατοκυτταρικό καρκίνωμα (HCC), τα γλοιώματα υψηλού βαθμού, ο παγκρεατικός καρκίνος και ο τριπλά αρνητικός καρκίνος μαστού, όπου η αγγειογένεση, η αθανασία και η αντίσταση στην απόπτωση είναι ιδιαίτερα έκδηλες. Σε αυτούς τους όγκους έχουν ήδη διερευνηθεί tumor specific promoters και targeted gene therapy προσεγγίσεις, προσφέροντας ένα ρεαλιστικό πλαίσιο για την εισαγωγή πιο σύνθετων συνθετικών κυκλωμάτων.

Η λογική του Biological Logic Voting συνδέεται στενά με την έννοια της synthetic lethality στην precision oncology, όπου εκμεταλλευόμαστε συνδυασμούς γονιδιακών αδυναμιών ώστε να σκοτώσουμε εκλεκτικά τα καρκινικά κύτταρα. Κλινικά παραδείγματα, όπως η χρήση PARP inhibitors σε όγκους με BRCA1/2 μεταλλάξεις, αποδεικνύουν ότι η πολύ παραγοντική στόχευση μπορεί να μεταφραστεί σε απτά οφέλη για ασθενείς με φτωχή πρόγνωση, υποστηρίζοντας την ιδέα ότι κυκλώματα όπως ο “Genome Sentinel” θα μπορούσαν να αποτελέσουν την επόμενη γενιά «λογικής» θεραπείας.

7. Ηθικά και ρυθμιστικά ζητήματα

Η ανάπτυξη ενός αυτόνομου βιολογικού επεξεργαστή με δυνατότητα κυτταροτοξικής δράσης εγείρει σημαντικά ηθικά και κοινωνικά ερωτήματα. Βασικά θέματα περιλαμβάνουν την πιθανότητα απρόβλεπτης συμπεριφοράς in vivo, τον κίνδυνο off target δράσης σε μη καρκινικά κύτταρα, καθώς και τη διαχείριση πιθανών μακροχρόνιων συνεπειών σε επίπεδο γονιδιώματος και μικροπεριβάλλοντος. Ιστορικές εμπειρίες από πρώιμες γονιδιακές θεραπείες δείχνουν ότι η έλλειψη επαρκούς ρύθμισης και διαφάνειας μπορεί να οδηγήσει σε σοβαρές ανεπιθύμητες ενέργειες και κοινωνική δυσπιστία.

Σε ρυθμιστικό επίπεδο, διεθνείς οργανισμοί όπως ο FDA/CBER και οι ευρωπαϊκές αρχές αντιμετωπίζουν τα προϊόντα κυτταρικής και γονιδιακής θεραπείας με αυξημένες απαιτήσεις ως προς την ασφάλεια, τη γονοτοξικότητα, την ανοσογονικότητα και τη μακροχρόνια παρακολούθηση των ασθενών. Παράλληλα, η διττή χρήση (dual use) τεχνολογιών συνθετικής βιολογίας και γονιδιακής επεξεργασίας απαιτεί ένα πλαίσιο διακυβέρνησης που βασίζεται σε αρχές μη βλάβης, δικαιοσύνης στην πρόσβαση και υπεύθυνης καινοτομίας, ώστε η ανάπτυξη «ζωντανών φαρμάκων» όπως ο “Genome Sentinel” να πραγματοποιείται με κοινωνικά αποδεκτό και βιοηθικά τεκμηριωμένο τρόπο.

8. Επίλογος & Statement of Intent

Το “Genome Sentinel” αντιπροσωπεύει ένα concept για επόμενης γενιάς «ζωντανά φάρμακα» (Living Medicines), όπου η απόφαση για κυτταρικό θάνατο λαμβάνεται εντός του ίδιου του κυττάρου, στη βάση μιας πολυπαραγοντικής λογικής αξιολόγησης του καρκινικού φαινοτύπου. Συνδυάζοντας tumor selective promoters, miRNA βασισμένες λογικές πύλες, suicide gene modules και εξωτερικά ελεγχόμενους διακόπτες ασφαλείας, η προσέγγιση αυτή μετατρέπει την αντικαρκινική θεραπεία από μία «τυφλή» συστημική παρέμβαση σε μια ψηφιακά προγραμματιζόμενη, βιολογικά ενσωματωμένη αναζήτηση και καταστροφή νεοπλασματικών κυττάρων.

Statement of Intent

«Ως ερευνητής, ο στόχος μου είναι να εκμηδενίσω τις παρενέργειες της χημειοθεραπείας, μεταφέροντας τη λήψη αποφάσεων από τον γιατρό στο ίδιο το κύτταρο – σε έναν βιολογικό επεξεργαστή που αναγνωρίζει, ζυγίζει και εξοντώνει τον όγκο με χειρουργική ακρίβεια.»

Πνευματικά Δικαιώματα & Νομική Σημείωση

© 2025 Δρ. Δημήτριος Γ. Κίμογλου. Με επιφύλαξη παντός νόμιμου δικαιώματος.

Το παρόν έγγραφο, καθώς και το σύνολο του περιεχομένου του (συμπεριλαμβανομένων των κειμένων, των πρωτότυπων επιστημονικών εννοιών, των διαγραμμάτων, των μαθηματικών μοντέλων και της αρχιτεκτονικής του συστήματος “GenomeSentinel”), αποτελεί πνευματική ιδιοκτησία του δημιουργού.

Απαγορεύεται ρητά:

• Η αναπαραγωγή, αναδημοσίευση, αντιγραφή ή αποθήκευση μέρους ή του συνόλου της εργασίας σε οποιοδήποτε σύστημα αρχειοθέτησης.

• Η μετάδοση ή διανομή σε οποιαδήποτε μορφή (ηλεκτρονική, μηχανική ή άλλη) για εμπορικούς ή άλλους σκοπούς.

• Η χρήση των ιδεών, της λογικής “Biological Logic Voting” ή των περιγραφόμενων γενετικών κυκλωμάτων χωρίς την προηγούμενη έγγραφη άδεια του Lead BioEngineer.

Οποιαδήποτε μη εξουσιοδοτημένη χρήση ενδέχεται να εγείρει αξιώσεις για αστική και ποινική ευθύνη σύμφωνα με την ισχύουσα νομοθεσία περί πνευματικής ιδιοκτησίας.